Pipeteerimise täpsust ja täpsust mõjutavad paljud tegurid

Jan 09, 2024

Jäta sõnum

Keemias, bioloogias ja meditsiinis on pipett tüüpiline laboriinstrument, mida kasutatakse etteantud koguse vedeliku väljastamiseks, sageli kandja dosaatorina. Pipeteerimise tulemuste edukus sõltub sellest, kui täpselt loete pipeti mahtu delikaatsete uuringute läbiviimisel. Täpsete ja kvaliteetsete mõõteriistade kasutamine on parim viis pipeti mahtude õige lugemise tagamiseks. Kuna laboratoorsed nõuded täpsusele ja täpsusele kasvavad, on ideaalsete pipeteerimistehnikate mõistmine ja täiustamine ülioluline.
Pipette kasutatakse teadusuuringutes ja need nõuavad suurt täpsust väikeste vedelikukoguste korrektseks mõõtmiseks ja ülekandmiseks.
Siiski võib pipeti mõõtmisvigade põhjuseks olla seadme rike või operaatori viga. Kõik muudatused väljastatavas mahus võivad mõjutada katsete (nt qPCR) tulemusi ja reprodutseeritavust.

Pipeti täpsust mõjutavad tegurid:
Temperatuur
Täpset pipettimist mõjutab suuresti temperatuur. Temperatuuride erinevus manustamisseadme ja vedeliku vahel on kõige mõjukam tegur. Soojuspaisumise juhtumispetsiifilised mõjud ilmnevad vedeliku pinna ja kolvi vahelises õhupilus (surnud õhu maht). Muude tagajärgede hulgas võib see vähendada või suurendada otsikusse tõmmatud vedeliku kogust.

Tihedus
Otsa sisse tõmmatud vedeliku kogust mõjutab tihedus (massi/mahu suhe). Aspireeritakse vähem tihedamat vedelikku kui sarnase protseduuri puhul, kasutades vett. Väiksema tihedusega vedelike puhul on tulemused vastupidised. Selle põhjuseks on paindlik surnud õhu maht ja Maa gravitatsioon. Vedeliku tihedus muutub ka temperatuuriga. Tavaliselt muutub ka vedeliku tihedus temperatuuriga. Temperatuuril 20 kraadi /68 kraadi F on vee tihedus tavaliselt 0,998 kg/dm3, etanooli tihedus on 0,79 kg/dm3 ja väävelhappe (95-98%) h2SO4) tihedus on 1,84 kg/dm3.

Kõrge
Täpsust mõjutavad õhurõhk ja geograafiline kõrgus. Mida kõrgem on kõrgus merepinnast, seda madalam on õhurõhk ja seda väiksem on teisendustegur.
Lisaks langevad mõnede vedelike keemistemperatuurid märkimisväärselt toatemperatuuri lähedale, suurendades sellega oluliselt aurustumiskadusid.

Reaktiivi aurustamine
Väga lenduvad reaktiivid neelavad auru, mis siseneb otsa ja tõstab siserõhku. Seetõttu tekivad vead vedeliku väljapressimisel suurenenud rõhu tõttu.

Valitud on vale pipeteerimisrežiim
Pipeteerimise ajal teevad operaatorid sageli juhuslikke või subjektiivseid otsuseid, kas kasutada tagasi- või edasi-tagasi režiimi. Viskoossed proovid peaksid siiski olema ainsad, mis kasutavad pöördrežiimi. Pöördrežiimis surutakse kolb proovi aspireerimiseks täielikult alla (üle esimese peatuse) ja seejärel ainult osaliselt (esimese peatuseni), et proov väljastada. Seetõttu põhjustab viskoossete vedelikega edasi-tagasi režiimi kasutamine alatarne, vesilahustega vastupidise režiimi kasutamine aga ületarnimise.

Kallutamine pipetiga
Proovikadu tekib siis, kui pipeti ots puutub aspireerimise ajal vastu anuma seina. Lisaks võib väikeste koguste pipetimisel pipeti nurga all väljatõmbamine põhjustada pindpinevuste tõttu mahu muutusi. Pipetti otse mahutist välja tõmbamine vähendab vigu.